Abstract

We present the design, construction, and initial characterization of a multifunctional imaging/scattering spectroscopy system built around a commercial inverted microscope platform. The system enables co-registered brightfield, Fourier-filtered darkfield, and fluorescence imaging; monochromatic angle-resolved scattering measurements; and white-light wavelength-resolved scattering spectroscopy from the same field of view. A fiber-based illumination system provides illumination-wavelength flexibility and a good approximation to a point source. The performance of the system in its various data acquisition modes is experimentally verified using fluorescent microspheres. This multifunctional instrument provides a platform for studies on adherent cells from which the biophysical implications of subcellular light scattering can be studied in conjunction with sensitive fluorescence-based techniques.

© 2007 Optical Society of America

Full Article  |  PDF Article

References

  • View by:
  • |
  • |
  • |

  1. H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
    [CrossRef]
  2. J. R. Mourant, T. M. Johnson, S. Carpenter, A. Guerra, T. Aida, and J. P. Freyer, J. Biomed. Opt. 7, 378 (2002).
    [CrossRef] [PubMed]
  3. C.-C. Yu, C. Lau, J. W. Tunnell, M. Hunter, M. Kalashnikov, C. Fang-Yen, S. F. Fulghum, K. Badizadegan, R. R. Dasari, and M. S. Feld, Opt. Lett. 31, 3119 (2006).
    [CrossRef] [PubMed]
  4. N. N. Boustany, Y. C. Tsai, B. Pfister, W. M. Joiner, G. A. Oyler, and N. V. Thakor, Biophys. J. 87, 4163 (2004).
    [CrossRef] [PubMed]
  5. G. Schuele, E. Vitkin, P. Huie, C. O'Connell-Rodwell, D. Palanker, and L. T. Perelman, J. Biomed. Opt. 10, 051404 (2005).
    [CrossRef] [PubMed]
  6. J. D. Wilson, C. E. Bigelow, D. J. Calkins, and T. H. Foster, Biophys. J. 88, 2929 (2005).
    [CrossRef] [PubMed]
  7. Y. Liu, X. Li, Y. L. Kim, and V. Backman, Opt. Lett. 30, 2445 (2005).
    [CrossRef] [PubMed]
  8. H. Fang, L. Qiu, E. Vitkin, M. M. Zaman, C. Andersson, S. Salahuddin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. K. Modell, B. S. Turner, S. E. Keates, I. Bigio, I. Itzkan, S. D. Freedman, R. Bansil, E. B. Hanlon, and L. T. Perelman, Appl. Opt. 46, 1760 (2007).
    [CrossRef] [PubMed]
  9. M. I. Mishchenko, L. D. Travis, and A. A. Lacis, Scattering, Absorption, and Emission of Light by Small Particles (Cambridge U. Press, 2002).
  10. N. N. Boustany, S. C. Kuo, and N. V. Thakor, Opt. Lett. 26, 1063 (2001).
    [CrossRef]
  11. M. T. Valentine, A. K. Popp, D. A. Weitz, and P. D. Kaplan, Opt. Lett. 26, 890 (2001).
    [CrossRef]
  12. X. Ma, J. Q. Lu, R. S. Brock, K. M. Jacobs, P. Yang, and X.-H. Hu, Phys. Med. Biol. 48, 4165 (2003).
    [CrossRef]
  13. K. K.-H. Wang, J. D. Wilson, M. E. Kenney, S. Mitra, and T. H. Foster, Photochem. Photobiol. DOI: 10.1111/j.1751-1097.2007.00128.x (2007).
  14. J. D. Wilson, W. J. Cottrell, and T. H. Foster, J. Biomed. Opt. 12, 014010 (2007).
    [CrossRef] [PubMed]

2007 (2)

2006 (1)

2005 (3)

G. Schuele, E. Vitkin, P. Huie, C. O'Connell-Rodwell, D. Palanker, and L. T. Perelman, J. Biomed. Opt. 10, 051404 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

J. D. Wilson, C. E. Bigelow, D. J. Calkins, and T. H. Foster, Biophys. J. 88, 2929 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

Y. Liu, X. Li, Y. L. Kim, and V. Backman, Opt. Lett. 30, 2445 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

2004 (1)

N. N. Boustany, Y. C. Tsai, B. Pfister, W. M. Joiner, G. A. Oyler, and N. V. Thakor, Biophys. J. 87, 4163 (2004).
[CrossRef] [PubMed]

2003 (2)

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

X. Ma, J. Q. Lu, R. S. Brock, K. M. Jacobs, P. Yang, and X.-H. Hu, Phys. Med. Biol. 48, 4165 (2003).
[CrossRef]

2002 (1)

J. R. Mourant, T. M. Johnson, S. Carpenter, A. Guerra, T. Aida, and J. P. Freyer, J. Biomed. Opt. 7, 378 (2002).
[CrossRef] [PubMed]

2001 (2)

Aida, T.

J. R. Mourant, T. M. Johnson, S. Carpenter, A. Guerra, T. Aida, and J. P. Freyer, J. Biomed. Opt. 7, 378 (2002).
[CrossRef] [PubMed]

Andersson, C.

Backman, V.

Badizadegan, K.

Bansil, R.

Bigelow, C. E.

J. D. Wilson, C. E. Bigelow, D. J. Calkins, and T. H. Foster, Biophys. J. 88, 2929 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

Bigio, I.

Bigio, I. J.

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

Boustany, N. N.

N. N. Boustany, Y. C. Tsai, B. Pfister, W. M. Joiner, G. A. Oyler, and N. V. Thakor, Biophys. J. 87, 4163 (2004).
[CrossRef] [PubMed]

N. N. Boustany, S. C. Kuo, and N. V. Thakor, Opt. Lett. 26, 1063 (2001).
[CrossRef]

Brock, R. S.

X. Ma, J. Q. Lu, R. S. Brock, K. M. Jacobs, P. Yang, and X.-H. Hu, Phys. Med. Biol. 48, 4165 (2003).
[CrossRef]

Calkins, D. J.

J. D. Wilson, C. E. Bigelow, D. J. Calkins, and T. H. Foster, Biophys. J. 88, 2929 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

Carpenter, S.

J. R. Mourant, T. M. Johnson, S. Carpenter, A. Guerra, T. Aida, and J. P. Freyer, J. Biomed. Opt. 7, 378 (2002).
[CrossRef] [PubMed]

Cipolloni, P. B.

H. Fang, L. Qiu, E. Vitkin, M. M. Zaman, C. Andersson, S. Salahuddin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. K. Modell, B. S. Turner, S. E. Keates, I. Bigio, I. Itzkan, S. D. Freedman, R. Bansil, E. B. Hanlon, and L. T. Perelman, Appl. Opt. 46, 1760 (2007).
[CrossRef] [PubMed]

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

Cottrell, W. J.

J. D. Wilson, W. J. Cottrell, and T. H. Foster, J. Biomed. Opt. 12, 014010 (2007).
[CrossRef] [PubMed]

Dasari, R. R.

Fang, H.

H. Fang, L. Qiu, E. Vitkin, M. M. Zaman, C. Andersson, S. Salahuddin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. K. Modell, B. S. Turner, S. E. Keates, I. Bigio, I. Itzkan, S. D. Freedman, R. Bansil, E. B. Hanlon, and L. T. Perelman, Appl. Opt. 46, 1760 (2007).
[CrossRef] [PubMed]

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

Fang-Yen, C.

Feld, M. S.

Foster, T. H.

J. D. Wilson, W. J. Cottrell, and T. H. Foster, J. Biomed. Opt. 12, 014010 (2007).
[CrossRef] [PubMed]

J. D. Wilson, C. E. Bigelow, D. J. Calkins, and T. H. Foster, Biophys. J. 88, 2929 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

K. K.-H. Wang, J. D. Wilson, M. E. Kenney, S. Mitra, and T. H. Foster, Photochem. Photobiol. DOI: 10.1111/j.1751-1097.2007.00128.x (2007).

Freedman, S. D.

H. Fang, L. Qiu, E. Vitkin, M. M. Zaman, C. Andersson, S. Salahuddin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. K. Modell, B. S. Turner, S. E. Keates, I. Bigio, I. Itzkan, S. D. Freedman, R. Bansil, E. B. Hanlon, and L. T. Perelman, Appl. Opt. 46, 1760 (2007).
[CrossRef] [PubMed]

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

Freyer, J. P.

J. R. Mourant, T. M. Johnson, S. Carpenter, A. Guerra, T. Aida, and J. P. Freyer, J. Biomed. Opt. 7, 378 (2002).
[CrossRef] [PubMed]

Fulghum, S. F.

Guerra, A.

J. R. Mourant, T. M. Johnson, S. Carpenter, A. Guerra, T. Aida, and J. P. Freyer, J. Biomed. Opt. 7, 378 (2002).
[CrossRef] [PubMed]

Hanlon, E. B.

Hanolon, E. B.

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

Hu, X.-H.

X. Ma, J. Q. Lu, R. S. Brock, K. M. Jacobs, P. Yang, and X.-H. Hu, Phys. Med. Biol. 48, 4165 (2003).
[CrossRef]

Huie, P.

G. Schuele, E. Vitkin, P. Huie, C. O'Connell-Rodwell, D. Palanker, and L. T. Perelman, J. Biomed. Opt. 10, 051404 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

Hunter, M.

Itzkan, I.

H. Fang, L. Qiu, E. Vitkin, M. M. Zaman, C. Andersson, S. Salahuddin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. K. Modell, B. S. Turner, S. E. Keates, I. Bigio, I. Itzkan, S. D. Freedman, R. Bansil, E. B. Hanlon, and L. T. Perelman, Appl. Opt. 46, 1760 (2007).
[CrossRef] [PubMed]

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

Jacobs, K. M.

X. Ma, J. Q. Lu, R. S. Brock, K. M. Jacobs, P. Yang, and X.-H. Hu, Phys. Med. Biol. 48, 4165 (2003).
[CrossRef]

Johnson, T. M.

J. R. Mourant, T. M. Johnson, S. Carpenter, A. Guerra, T. Aida, and J. P. Freyer, J. Biomed. Opt. 7, 378 (2002).
[CrossRef] [PubMed]

Joiner, W. M.

N. N. Boustany, Y. C. Tsai, B. Pfister, W. M. Joiner, G. A. Oyler, and N. V. Thakor, Biophys. J. 87, 4163 (2004).
[CrossRef] [PubMed]

Kalashnikov, M.

Kaplan, P. D.

Keates, S. E.

Kenney, M. E.

K. K.-H. Wang, J. D. Wilson, M. E. Kenney, S. Mitra, and T. H. Foster, Photochem. Photobiol. DOI: 10.1111/j.1751-1097.2007.00128.x (2007).

Kim, Y. L.

Kimerer, L. M.

H. Fang, L. Qiu, E. Vitkin, M. M. Zaman, C. Andersson, S. Salahuddin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. K. Modell, B. S. Turner, S. E. Keates, I. Bigio, I. Itzkan, S. D. Freedman, R. Bansil, E. B. Hanlon, and L. T. Perelman, Appl. Opt. 46, 1760 (2007).
[CrossRef] [PubMed]

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

Kuo, S. C.

Lacis, A. A.

M. I. Mishchenko, L. D. Travis, and A. A. Lacis, Scattering, Absorption, and Emission of Light by Small Particles (Cambridge U. Press, 2002).

Lau, C.

Li, X.

Liu, Y.

Lu, J. Q.

X. Ma, J. Q. Lu, R. S. Brock, K. M. Jacobs, P. Yang, and X.-H. Hu, Phys. Med. Biol. 48, 4165 (2003).
[CrossRef]

Ma, X.

X. Ma, J. Q. Lu, R. S. Brock, K. M. Jacobs, P. Yang, and X.-H. Hu, Phys. Med. Biol. 48, 4165 (2003).
[CrossRef]

Mishchenko, M. I.

M. I. Mishchenko, L. D. Travis, and A. A. Lacis, Scattering, Absorption, and Emission of Light by Small Particles (Cambridge U. Press, 2002).

Mitra, S.

K. K.-H. Wang, J. D. Wilson, M. E. Kenney, S. Mitra, and T. H. Foster, Photochem. Photobiol. DOI: 10.1111/j.1751-1097.2007.00128.x (2007).

Modell, M. K.

Mourant, J. R.

J. R. Mourant, T. M. Johnson, S. Carpenter, A. Guerra, T. Aida, and J. P. Freyer, J. Biomed. Opt. 7, 378 (2002).
[CrossRef] [PubMed]

O'Connell-Rodwell, C.

G. Schuele, E. Vitkin, P. Huie, C. O'Connell-Rodwell, D. Palanker, and L. T. Perelman, J. Biomed. Opt. 10, 051404 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

Ollero, M.

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

Oyler, G. A.

N. N. Boustany, Y. C. Tsai, B. Pfister, W. M. Joiner, G. A. Oyler, and N. V. Thakor, Biophys. J. 87, 4163 (2004).
[CrossRef] [PubMed]

Palanker, D.

G. Schuele, E. Vitkin, P. Huie, C. O'Connell-Rodwell, D. Palanker, and L. T. Perelman, J. Biomed. Opt. 10, 051404 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

Perelman, L. T.

H. Fang, L. Qiu, E. Vitkin, M. M. Zaman, C. Andersson, S. Salahuddin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. K. Modell, B. S. Turner, S. E. Keates, I. Bigio, I. Itzkan, S. D. Freedman, R. Bansil, E. B. Hanlon, and L. T. Perelman, Appl. Opt. 46, 1760 (2007).
[CrossRef] [PubMed]

G. Schuele, E. Vitkin, P. Huie, C. O'Connell-Rodwell, D. Palanker, and L. T. Perelman, J. Biomed. Opt. 10, 051404 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

Pfister, B.

N. N. Boustany, Y. C. Tsai, B. Pfister, W. M. Joiner, G. A. Oyler, and N. V. Thakor, Biophys. J. 87, 4163 (2004).
[CrossRef] [PubMed]

Popp, A. K.

Qiu, L.

Salahuddin, S.

Schuele, G.

G. Schuele, E. Vitkin, P. Huie, C. O'Connell-Rodwell, D. Palanker, and L. T. Perelman, J. Biomed. Opt. 10, 051404 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

Thakor, N. V.

N. N. Boustany, Y. C. Tsai, B. Pfister, W. M. Joiner, G. A. Oyler, and N. V. Thakor, Biophys. J. 87, 4163 (2004).
[CrossRef] [PubMed]

N. N. Boustany, S. C. Kuo, and N. V. Thakor, Opt. Lett. 26, 1063 (2001).
[CrossRef]

Travis, L. D.

M. I. Mishchenko, L. D. Travis, and A. A. Lacis, Scattering, Absorption, and Emission of Light by Small Particles (Cambridge U. Press, 2002).

Tsai, Y. C.

N. N. Boustany, Y. C. Tsai, B. Pfister, W. M. Joiner, G. A. Oyler, and N. V. Thakor, Biophys. J. 87, 4163 (2004).
[CrossRef] [PubMed]

Tunnell, J. W.

Turner, B. S.

Valentine, M. T.

Vitkin, E.

H. Fang, L. Qiu, E. Vitkin, M. M. Zaman, C. Andersson, S. Salahuddin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. K. Modell, B. S. Turner, S. E. Keates, I. Bigio, I. Itzkan, S. D. Freedman, R. Bansil, E. B. Hanlon, and L. T. Perelman, Appl. Opt. 46, 1760 (2007).
[CrossRef] [PubMed]

G. Schuele, E. Vitkin, P. Huie, C. O'Connell-Rodwell, D. Palanker, and L. T. Perelman, J. Biomed. Opt. 10, 051404 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

Wang, K. K.-H.

K. K.-H. Wang, J. D. Wilson, M. E. Kenney, S. Mitra, and T. H. Foster, Photochem. Photobiol. DOI: 10.1111/j.1751-1097.2007.00128.x (2007).

Weitz, D. A.

Wilson, J. D.

J. D. Wilson, W. J. Cottrell, and T. H. Foster, J. Biomed. Opt. 12, 014010 (2007).
[CrossRef] [PubMed]

J. D. Wilson, C. E. Bigelow, D. J. Calkins, and T. H. Foster, Biophys. J. 88, 2929 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

K. K.-H. Wang, J. D. Wilson, M. E. Kenney, S. Mitra, and T. H. Foster, Photochem. Photobiol. DOI: 10.1111/j.1751-1097.2007.00128.x (2007).

Yang, P.

X. Ma, J. Q. Lu, R. S. Brock, K. M. Jacobs, P. Yang, and X.-H. Hu, Phys. Med. Biol. 48, 4165 (2003).
[CrossRef]

Yu, C.-C.

Zaman, M. M.

H. Fang, L. Qiu, E. Vitkin, M. M. Zaman, C. Andersson, S. Salahuddin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. K. Modell, B. S. Turner, S. E. Keates, I. Bigio, I. Itzkan, S. D. Freedman, R. Bansil, E. B. Hanlon, and L. T. Perelman, Appl. Opt. 46, 1760 (2007).
[CrossRef] [PubMed]

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

Appl. Opt. (1)

Biophys. J. (2)

J. D. Wilson, C. E. Bigelow, D. J. Calkins, and T. H. Foster, Biophys. J. 88, 2929 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

N. N. Boustany, Y. C. Tsai, B. Pfister, W. M. Joiner, G. A. Oyler, and N. V. Thakor, Biophys. J. 87, 4163 (2004).
[CrossRef] [PubMed]

IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. (1)

H. Fang, M. Ollero, E. Vitkin, L. M. Kimerer, P. B. Cipolloni, M. M. Zaman, S. D. Freedman, I. J. Bigio, I. Itzkan, E. B. Hanolon, and L. T. Perelman, IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron. 9, 267 (2003).
[CrossRef]

J. Biomed. Opt. (3)

J. R. Mourant, T. M. Johnson, S. Carpenter, A. Guerra, T. Aida, and J. P. Freyer, J. Biomed. Opt. 7, 378 (2002).
[CrossRef] [PubMed]

G. Schuele, E. Vitkin, P. Huie, C. O'Connell-Rodwell, D. Palanker, and L. T. Perelman, J. Biomed. Opt. 10, 051404 (2005).
[CrossRef] [PubMed]

J. D. Wilson, W. J. Cottrell, and T. H. Foster, J. Biomed. Opt. 12, 014010 (2007).
[CrossRef] [PubMed]

Opt. Lett. (4)

Phys. Med. Biol. (1)

X. Ma, J. Q. Lu, R. S. Brock, K. M. Jacobs, P. Yang, and X.-H. Hu, Phys. Med. Biol. 48, 4165 (2003).
[CrossRef]

Other (2)

K. K.-H. Wang, J. D. Wilson, M. E. Kenney, S. Mitra, and T. H. Foster, Photochem. Photobiol. DOI: 10.1111/j.1751-1097.2007.00128.x (2007).

M. I. Mishchenko, L. D. Travis, and A. A. Lacis, Scattering, Absorption, and Emission of Light by Small Particles (Cambridge U. Press, 2002).

Cited By

OSA participates in CrossRef's Cited-By Linking service. Citing articles from OSA journals and other participating publishers are listed here.

Alert me when this article is cited.


Figures (3)

Fig. 1
Fig. 1

Schematic diagram of the scattering microscope setup shown in imaging (A) and spectroscopy (B) modes. Dotted and solid lines represent axial rays for Fourier and image planes in the system.

Fig. 2
Fig. 2

Representative data from 4 - μ m diameter fluorescent polystyrene microspheres. (A) Brightfield, (B) darkfield, and (C) fluorescence images of the same field of view and (D) the corresponding Fourier-plane image illustrates unprocessed CCD data. Annular binning of the Fourier image results in (E) an angle-resolved scattering measurement that can be fit by Mie theory, where data and Mie fits for 4- and 2 - μ m beads are shown (offset for clarity). (F) In spectroscopy mode, a wavelength-resolved scattering spectrum and absorbing-sphere Mie fit that is very sensitive to refractive index.

Fig. 3
Fig. 3

Fluorescence images of EMT6 cell monolayers following overnight incubation with 250 nM Pc 4 (A) pre- and (B) post-PDT with 600 mJ cm 2 irradiation at 667 nm . (C) Angularly resolved light scattering data ± standard error of the mean from the binned Fourier plane images for these same cell populations. Error bars are smaller than plot symbols.

Metrics